Протокол исследований воды и ила озер Линево и Данилово

  •  
  •  
  •  
  •  
  •  

ПРОТОКОЛ
исследований воды и ила озер Линево и Данилово

Омской области методом биоиндикации на клеточной культуре человека HЕР-2
Исследования выполнены группой в составе:

Михайлова Л.П., доктор мед. наук, ведущий научный сотрудник Лаборатории морфологии и клеточных культур Научного центра клинической и экспери­ментальной медицины АМН — руководитель работ,
Игнатович Н.В. ст.н.сотрудник к.б.н.,
Ахроменко Е.С. научный сотрудник.
В лабораторию морфологии и клеточных культур поступила вышеуказанная вода для изучения на

  1. токсичность,
  2. активирующие свойства воды, влияющие на рост клеточной культуры и повышающие ее жизнеспособность (SP),
  3. деление клеток, т.е. митотическую активность клеточной культуры (МА%)
  4. исследование синтеза клеточного белка

Исследования проводилось на клеточной культуре Hep – 2.

Методика

После формирования клеточного монослоя культуральная среда заменялась на питательную среду, содержащую исследуемую воду. Контролем служила клеточная культура без дополнения воды. Готовились морфологические препараты на 48, 72 и 120 часов по общей принятой ме­тодике, проводился подсчет общего количества клеток (Sp) и митозов (деления клеток  MA%) под микроскопом по методике С.Б.Стефанова.

Ниже приводятся краткие результаты исследований.
Результаты исследований.
При исследовании воды озера Линева и Данилова проведены экспозиции клеток в термостате в течение 48, 72 и 120 часов.

Вода из оз. Линево:

взято 2 пробы – одна с поверхности озера, вторая на глубине 1 – 1,5 м.

Таблица №1

 
 Параметр48 часов72 часа120 часовБелок(г/л)
Контроль чистыйSp MA%53.9±0.3 0.968.2±0.5 1.079.6±0.8 0.851.2
Контроль  водопроводная водаSp MA%48.8±0.3 0.761.3±0.4 0.872.3±0.5 0.639.6
Вода оз. Линево(поверхн.)Sp MA%63.1±0.4 0.979.2±0.8 1.191.3±1.0 1.463.2
Вода  оз. Линево(гл. 1-1,5 м)Sp MA%59.0±0.3 0.871.5±0.7 0.983.2±0.9 1.059.6

Вода с поверхности озера. При экспозиции 48 ч. она активно влияет на рост клеток монослоя при сравнении с контрольной культурой, выросшей на питательных средах без добавлении воды, и с добавлением водопроводной воды. Клеток выросло на 18 – 20% больше, а МА% на уровне контроля. Клетки живые, блестящие, хорошо распластанные на стекле. Ядра крупные, хорошо видна мембрана, ядра и ядрышки (2-3 штуки).

При экспозиции 72 ч. наблюдается тоже активное воздействие на клетки. Клеток в монослое по сравнению с контролем больше, также на 20%, но МА% (деление клеток) несколько выросла. Погибших клеток  — нет, патологии митозов (деления клеток) – нет.

Экспозиция 120 ч. Очень густой монослой, высокая митотическая активность МА% – (контроль 0,8 , опыт – 1,4%), высокое содержание белка (62,2).

Высокие значения МА% и количества синтезируемого белка указывают на повышение качества воды, ее активного воздействия на рост клеток и, таким образом, на повышение жизнеспособности клеток.

Вода, взятая на глубине 1,0 – 1,5 м. При экспозиции 48 ч. активность очень небольшая (8-10%) по сравнению с контролем, МА% (деление клеток) фактически на уровне контроля. При экспозиции 72 ч монослой клеток вырос более густой (SP) по сравнению с контролем, МА% выше всего на  10% (0,9 – 1,0%)

При экспозиции 120 ч. – фактически те же результаты, но активность возросла на 10%.

Таким образом, вода, взятая на глубине, менее активна, хотя клетки живые, хорошо видны ядра с ядрышками, цитоплазма прозрачна, но погибших клеток почти нет (в пределах нормы). Патологии митозов нет.

Вода из оз. Данилово

Проба взята с поверхности озера.

Таблица №1а

 Параметр48 часов72 часа120 часовБелок(г/л)
Контроль чистыйSp MA%53.9±0.3 0.968.2±0.5 1.079.6±0.8 0.851.2
Контроль  водопроводная водаSp MA%48.8±0.3 0.761.3±0.4 0.872.3±0.5 0.639.6
Вода  оз. ДаниловоSp MA%64.2±0.4 1.081.2±0.8 1.393.2±1.0 1.268.7

Вода оз. Данилово, отличается как по своей активности (SP) , так и по делению клеток МА%, от контроля.

Экспозиция 48 ч. Вода  обладает биоэнергетической активностью: в монослое клеток больше, чем в контроле на 20%, митотическая активность высокая (контроль – 0,6%, опыт – 1,0%). Патологии митозов – нет.

При экспозиции 72 ч. Клеток по сравнению с 48 ч. экспозицией вросло на 30% больше, высокая митотическая активность (деление клеток) (контроль – 0,9%, опыт – 1,2%).

Начиная с экспозиции 48 ч и до 120 ч, идет все время повышение плотности монослоя (SP)и увеличение количества деления клеток. резко повышен синтез белка по сравнению с контролем.

Клетки при морфологическом исследовании – жизнеспособны, и, судя по количеству белка и МА%, длительно будут жизнеспособны. Клетки распластаны на стекле, крупные, хорошо видны цитоплазма и ядро, содержащее 3 – 4 ядрышка. Клетки готовы к синтезу. Погибших клеток нет, патологии митозов — нет

Вода обладает биоэнергетической активностью.

Такая вода нетоксична, годится как питьевая очень высокого качества. Активирует деление клеток, это в свою очередь означает, что она повышает жизнеспособность клеток уже своей биоэнергетической активностью.

Исследование илов оз. Линево и Данилово

Таблица №2

 
 Параметр48 часов72 часа120 часовБелок(г/л)
КонтрольSp MA%51.2±0.2 0.865.1±0.4 0.981.2±0.9 1.058.6
Ил  -Линево (ближе к берегу)Sp MA%68.2±0.5 0.881.1±0.9 1.094.2±1.0 1.064.5
Ил -Линево (дальше от берега)Sp MA%69.5±0.5 0.780.9±0.9 0.993.4±1.1 1.062.4
Ил  -Данилово (ближе к берегу)Sp MA%69.5±0.5 0.886.7±07 1.098.1±0.2 1.264.5

Взято 2 пробыоз. Линево: близко от берега (на урезе воды) и на расстоянии 1.5 – 2 м от него, и одна на оз. Данилово (на урезе воды). Для исследований ил разводился 1:50, и по вышеописанной методике исследовался на клеточной культуре НЕР – 2.

Результаты.

1 проба (близко к берегу). При экспозиции 48 ч экстракт ила, добавленный в питательную среду для клеток, воздействует активно на клетки. Монослой клеток (SP) гуще на 20%, чем в контрольной культуре, но МА% соответствует контролю. При экспозиции 72 ч наблюдается та же активность воздействия  на рост клеток (контроль 65.1 – опыт 81.1), МА% несколько выше – на 10%. При экспозиции 120 ч наблюдается та же картина

Таким образом, установлено, что придонный ил в разведении 1:50 обладает активным воздействием на клетки, повышая рост клеток, но митозы нарастают медленно.

2 проба (на расстоянии 1.5 – 2 м от берега). При экспозиции 48 ч клеток (SP) наросло на 20% больше, чем в контроле, МА% соответствует контролю. 20%, чем в контрольной культуре, но МА% соответствует контролю. При экспозиции 72 ч та же активность роста клеток, МА% соответствует контролю. Та же картина и для экспозиции 120 ч.

3 проба (оз. Данилово) характеризуется  по сравнению с контролем также высокими значениями параметров SP и МА%, более того эти параметры превосходят результаты, полученные для проб озера Линево. 

Во всех пробах активно синтезируется белок (по сравнению с контролем), это еще раз подтверждает, что ил обладает активным воздействием на биосистемы, т.е. на клетки и, априорно, на человека.
Видимо, илы и вода этих озер могут обладать лечебными свойствами.
Исследование биоэнергетического воздействия воды озер Данилово, Линево на клетки человека .

Методика. В чашку Петри наливается вода исследуемого озера, и ставятся флаконы со стеклами, на которых находится выращенный монослой. Чашки находятся в термостате при температуре 37º С. Экспозиция 48 и 72 часа.

Затем готовится морфологический препарат: стекла извлекаются, клетки фиксируются и окрашиваются по Романовскому. Далее обсчитываются под микроскопом

  1. количество выросших клеток на стекле, т.е. плотность роста (SP)
  2. количество делящихся клеток– митотическая активность монослоя (МА%).

Обсчет указанных параметров производится под микроскопом по сетке С.Б. Стефанова.

Таблица №3

БИОЭНЕРГЕТИКА
 Параметр48 часов72 часа
Контроль чистыйSp MA%48.4±0.3 0.669.8±0.7 0.9
Контроль  водопроводная водаSp MA%48.8±0.3 0.761.3±0.4 0.8
Вода оз. Линево(поверх)Sp MA%61.2±0.4 0.982.7±0.8 1.2
Вода оз. Линево(гл. 1-2 м)Sp MA%56.4±0.5 0.777.6±0.7 1.0
Вода  оз. ДаниловоSp MA%67.3±0.4 1.089.6±1.0 1.2

Вода оз. Линево(с поверхности)  при экспозиции 48 ч. влияет на рост клеток монослоя при сравнении с контрольной культурой, выросшей на питательных средах без добавлении воды, и с добавлением водопроводной воды. Клеток выросло на 25% больше, а МА% выше контроля (контроль – 0,6, опыт 0,9). Клетки живые, блестящие, хорошо распластанные на стекле. Ядра крупные, хорошо видна мембрана, ядра и ядрышки (2-3 штуки).

При экспозиции 72 ч. тоже наблюдается активное воздействие на клетки. Клеток в монослое по сравнению с контролем больше на 20%, но МА% (деление клеток) существенно выросла (контроль – 0,9, опыт 1,2). Погибших клеток  — нет, патологии митозов (деления клеток) – нет.

Высокие значения МА% указывают на повышение качества воды, ее активного воздействия на рост клеток и, таким образом, на повышение жизнеспособности клеток

Вода, взятая на глубине 1,0 – 1,5 м. При экспозиции 48 ч. активность очень небольшая -15% по сравнению с контролем, МА% (деление клеток) несколько выше контроля. При экспозиции 72 ч монослой клеток (SP) несколько выше контроля –на 10%, МА% так же выше  — всего на  10% (0,9 – 1,0%)

Вода оз. Данилово

Экспозиция 48 ч. Вода  обладает еще большей биоэнергетической активностью: в монослое клеток больше, чем в контроле на 40%(!), митотическая активность высокая (контроль – 0,6%, опыт – 1,0%). Патологии митозов – нет.

При экспозиции 72 ч. Клеток по сравнению с 48 ч. экспозицией вросло на 28% больше, высокая митотическая активность (деление клеток) (контроль – 0,9%, опыт – 1,2%).

Исследования биоэнергетической активности вод, обследованных озер, подтверждает, что вода высокого качества и обладает высокой биоэнергетической активностью, т.е. может повышать биоэнергетику не только клетки, но и человека.

Такая вода уникальна по своим свойствам и пригодна как высококачественная питьевая вода и для приготовления лечебных и других растворов.

Выводы.

Изучение воды оз. Линево особенно с поверхности озера, и с глубины показало, что вода хорошего качества, активно влияет на рост клеток, а значит и на человека. Годится как питьевая вода. Необходимо отметить, что вода, взятая с поверхности более активна. На наш взгляд, это объясняется тем, что водная поверхность больше подвергается солнечному и космическому (межпланетарное магнитное поле, гравитация) воздействию, приводящему к структурным перестройкам в молекулах воды. В прежних экспериментах нашего института (ИКЭМ СО РАМН) мы изучали эти вопросы, и ответ был однозначен.

Что касается ила оз. Линево, то он также активно воздействует на клетки, а значит и на человека. И вода и ил, учитывая результаты синтеза белка, клеточного монослоя, митоза клеток, активного роста монослоя (SP) может обладать лечебными свойствами.

Исследования воды оз. Данилово показали, как и ранее ( результаты 2002 г), высокую активность монослоя, превосходящую этот параметр, чем в оз. Линево.

Клетки прекрасно растут, начиная с 48 ч и по 120 ч, они здоровые, блестящие, с крупными ядрами, ядрышками, готовые к синтезу (т.е. дальнейшему росту, поскольку накапливается большое количество белка).

Установлено, что вода и ил оз. Линево и Данилово, особенно Данилово, активно повышают жизнеспособность биосистемы: клетки и , априорно, и человека не только своими качествами,- повышенным ростом клеток, увеличением количеством митозов, повышением синтеза клеточного белка, но и наличием биоэнергетики.

При сравнении качества воды оз. Линево и Данилово с еще одним контрольным монослоем клеток с добавлением водопроводной воды (см. табл. 1 и 1а) прекрасно видно насколько эти пробы воды активны по своему воздействию на клетки человека: повышают жизнеспособность(Sp), наблюдается большее количество делящихся клеток и, что очень важно, всегда зафиксирован высокий синтез клеточного белка.  Исследованная озерная вода обладает  биоэнергетической активностью (см. табл. 3), превосходящую водопроводную, в зависимости от времени экспозиции, на 24 – 45%, количество митозов также всегда много больше, чем в водопроводной.

И по этому показателю вода озер уникальна и годится для человека своим высоким качеством.

Вода озер Линево и Данилово является водой высокого качества. Она уникальна по своим свойствам и пригодна как высококачественная питьевая вода, а также  для приготовления лечебных и других различных растворов для повышения здоровья человека.

Доктор медицинских наук, ведущий научный сотрудник, руководитель работ Михайлова Л.П.


  •  
  •  
  •  
  •  
  •